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실험제목
크로마토그래피
실험목적
정상과 역상 크로마토그래피에 의한 색소의 분리를 통하여 크로마토그래피의 원리와 극성의 개념을 배운다.
실험도구
실험A. 얇은 층 크로마토그래피에 의한 색소의 분리(정상 크로마토그래피)
100 mL 비이커, 시계접시, 모세관, TLC 판(폭 4 cm, 높이 6 cm 정도)
적색40호, 황색4호, 청색1호의 식용 색소
전개제 (1-뷰탄올: 아세트산: 물의 비가 60:15:25인 혼합용액)
실험B. 컬럼 크로마토그래피를 이용한 색소의 분리(정상 크로마토그래피)
10 mL 주사기, 거름종이, 솜, 피펫, 유리막대
실리카 겔, 전개제(1-부탄올과 NH3 를 6:2로 혼합한 용액)
실험원리

실험원리

실험원리

1. Chromatography
- 복잡한 화합물을 구성하는 유사한 화합물을 분리할 수 있는 다양한 분리법.
2. 크로마토그래피의 구성요소
① 정지상(stationary phase) : solid support(고체 지지제) 흡착제
② 이동상(mobile phase) : 혼합용액 전개제
3. 크로마토그래피의 원리
- 분리하고자 하는 물질을 적당한 용매에 용해시켜서 이동상을 따라서 이동시키거나 고정상에 흡착됨으로써 분리가 된다. 이는 정지상과 이동상의 친화도에 따라 분리하고자 하는 물질의 각 성분이 분배되는 정도가 달라지기 때문이다.
즉, 고정상에 강하게 결합한 성분은 고정상에 존재하고 약하게 결합한 성분은 이동상을 따라 고정상을 통과하고, 결국 각 성분은 다른 속도로 이동하므로 분리된다. 이와 같은 과정을 용리(resolution)라 하고, 이러한 이동거리를 나타내기 위해 Rf (rate of flow)를 사용한다.
Rf 〓 각 시료가 움직인 거리/용매가 움직인 거리(용매선)
4. 크로마토크래피의 분류
A. 고정상과 용질(solute)의 interaction(분리의 원인)에 따른 분류

① 흡착크로마토그래피(adsorption chromatography): 화합물이 고 체표면에 흡착되는 정도의 차이를 이용
② 겔 투과 크로마토그래피(gel permeation chromatography): 작 은 분자가 교대로 결합된 겔의 틈새를 잘 침투하는 효과를 이용
③ 이온교환 크로마토그래피(ion exchange chromatography): 주 어진 pH에서 화합물이 해리해서 생긴 이온의 전하 차이를 이용
④ 분배 크로마토그래피(partition chromatography): 용매에 녹는 정도가 다른 점을 이용
B. 이동상에 따른 분류

① 기체 크로…(생략)

 

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